Un ensemble d’outils protéomiques pour la caractérisation de protéines d’organismes très divers : plantes, champignons et parasites
thesis · 2026
| Date | 2026-03-31 |
| Type | thesis |
| Publisher | PhD thesis |
| Contribution | downstream-application |
| DOI | 10.70675/65778fbez2051z43fez97bdzbc7dfde5f8c8 |
| Citations (OpenAlex) | 0 |
Abstract
L’analyse protéomique par spectrométrie de masse s’est imposée comme une méthode incontournable pour la caractérisation des protéines. Grâce aux progrès de l’instrumentation et de la bioinformatique, l’interprétation automatisée des spectres MS/MS permet aujourd’hui d’identifier des milliers de protéines dans un type cellulaire. Cependant, cette méthodologie s’applique encore difficilement aux organismes dont les génomes n’ont pas été séquencés, et donc pour lesquels il n’existe pas de banques de séquences peptidiques de référence. Notre travail a porté sur le développement et l’application d’une méthodologie d’interprétation des données MS/MS pour les organismes à génomes non séquencés. Cette méthodologie est basée sur le séquençage de novo suivi de recherche MS-BLAST. Ainsi nous avons pu : Identifier les différents partenaires de complexes protéiques tels que les protéines des complexes TgGAP50, TgAlba, TgSORTLR impliqués dans la motilité, la virulence ou le trafic intracellulaire des protéines du parasite Toxoplasma gondii, Identifier et caractériser des variants d’hémoglobine humaine, Identifier les protéines différentiellement exprimées lors des interactions vigne et champignons à génomes non séquencés dans la maladie de l’esca, Caractériser finement la N-glycosylation de l’invertase vacuolaire du raisin. Nous avons pu réaliser nos études sur des échantillons d’origines très différentes : homme, plantes, champignons, parasites et nous avons apporté des éléments de réponses moléculaires aux questions biologiques.
Methods and tools
- De novo plus MS-BLAST for unsequenced organisms (thesis): A thesis developing and applying de novo sequencing followed by MS-BLAST to characterise proteins from plants, fungi and parasites without sequenced genomes.
Methods it uses
- MS BLAST: Homology search of error-tolerant de novo sequences against a protein database, introduced for charting the proteomes of organisms with unsequenced genomes and later used to validate borderline identifications.
Cites (19)
- Tutorial on de novo peptide sequencing using MS/MS mass spectrometry (2012) crossref
- ADEPTS: Advanced peptide de novo sequencing with a pair of tandem mass spectra (2010) crossref
- A comparative study of the accuracy of several de novo sequencing software packages for datasets derived by matrix‐assisted laser desorption/ionisation and electrospray (2008) crossref
- Proteome Analysis of Pitcher Fluid of the Carnivorous Plant Nepenthes alata (2008) crossref
- Sequence similarity‐driven proteomics in organisms with unknown genomes by LC‐MS/MS and automated de novo sequencing (2007) crossref
- Performance Evaluation of Existing De Novo Sequencing Algorithms (2006) crossref
- Rapid Validation of Protein Identifications with the Borderline Statistical Confidence via De Novo Sequencing and MS BLAST Searches (2006) crossref
- AUDENS: A Tool for Automated Peptide de Novo Sequencing (2005) crossref
- PepNovo: de novo peptide sequencing via probabilistic network modeling (2005) crossref
- Sequence optimization as an alternative to de novo analysis of tandem mass spectrometry data (2004) crossref
- De novo sequencing, peptide composition analysis, and composition-based sequencing: A new strategy employing accurate mass determination by Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry (2004) crossref
- PEAKS: powerful software for peptide de novo sequencing by tandem mass spectrometry (2003) crossref
- Searching Sequence Databases via De Novo Peptide Sequencing by Tandem Mass Spectrometry (2002) crossref
- Charting the Proteomes of Organisms with Unsequenced Genomes by MALDI-Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometry and BLAST Homology Searching (2001) crossref
- De novo peptide sequencing via tandem mass spectrometry (1999) crossref
- Role of Accurate Mass Measurement (±10 ppm) in Protein Identification Strategies Employing MS or MS/MS and Database Searching (1999) crossref
- Sequence database searches via de novo peptide sequencing by tandem mass spectrometry (1997) crossref
- Error-Tolerant Identification of Peptides in Sequence Databases by Peptide Sequence Tags (1994) crossref
- PAAS 3: A computer program to determine probable sequence of peptides from mass spectrometric data (1984) crossref